Apibrėžimas chemotaksė

Chemotaxis yra kai kurių ląstelių reakcija į tam tikrų cheminių medžiagų koncentraciją aplinkoje . Šis reiškinys leidžia, pavyzdžiui,, kad bakterija patenka į vietovę, kurioje yra didesnis maisto medžiagų kiekis ir toli nuo tos vietos, kur yra toksiškų elementų.

Eksperimentinis instrumentas, naudojamas eukariotinių ar prokariotinių ląstelių chemotaktiniam gebėjimui įvertinti, yra žinomas chemotaksinio tyrimo pavadinimu, o jo taikymas apima daugybę metodų, iš kurių kai kurie yra kokybiški (tyrėjai turi galimybę nustatyti, kurios ląstelės yra chemiškai įvertinti ar palikti šalį) ir kiti, kiekybiniai (jie pateikia labai išsamius duomenis apie atsakymų intensyvumą).

Kalbant apie kokybės kontrolę, svarbiausias dalykas, tiriant ligandą (koordinavimo kompleksą, sudarytą iš molekulės arba jono, prijungto prie centrinio metalo atomo), ir ląstelių modelis paprastai yra laiko kalibravimas. inkubacijos ; trumpas neleidžia ląstelėms likti mėginyje, o pailgintoji sukelia medžiagų koncentracijos pokyčius, taip pat chemotaktinius ir chemokokinetinius atsakus.

Yra dvi kokybės kontrolės metodų grupės :

* Plokštelinis agaras : tai vertinimo klasė, kurią sudaro pusiau kietų kultūrų naudojimas su želatina arba agaro agaru, supjaustytas plonais sluoksniais ir pripildytas medžiaga ir bandomosiomis ląstelėmis. Gali būti, kad ląstelės migruoja minėto sluoksnio cheminio gradiento kryptimi ir taip pat ir po juo. Tam tikri šios technikos variantai, pvz., Vadinamasis PP, naudoja bandymų (trijų ar daugiau, šiuo atveju) ir šulinių, tarpusavyje sujungtų prieš eksperimento pradžią, buvimą.

PP metodas gali turėti apvalią formą, ir tokiu atveju jis leidžia atlikti preferencinį ligandų tyrimą arba įvairių ląstelių populiacijų aktyvumo palyginimą. Galima suskaičiuoti ląsteles, kurios po dažymo, migracijos ar optinių mikroskopų, esant normalioms sąlygoms, rodo teigiamą atsaką;

* dvi kameros : du fotoaparatai yra izoliuoti naudojant filtrus, kad būtų galima tiksliai stebėti, kaip išsivysto chemotaksis. Apatinė kamera yra užpildyta bandomąja medžiaga, o viršutinėje dalyje yra mobiliosios ląstelės.

Rekomenduojama